佰莱博生物大规模重组蛋白表达纯化服务


重组蛋白(recombinant protein)是指应用重组 DNA 或重组 RNA 技术而获得的具有一定功能或活性的蛋白质。重组蛋白工程先应用基因克隆或化学合成技术获得目的基因(gene of interestGOI),连接到适合的表达载体,导入到特定的宿主细胞,利用宿主细胞的遗传系统,表达出有功能的蛋白质分子。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、细胞功能试验、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发等众多领域。近十年来,随着药物蛋白的快速发展,越来越多的高纯度高活性蛋白应用于生命科学和医学等研究领域,如:抗体制备、ELISA、药物研究、免疫实验、细胞培养、晶体结构分析等。

当前,重组蛋白的表达系统主要有:原核细胞(主要是大肠杆菌)、酵母细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞表达系统。也可以利用植物(如烟草和胡萝卜悬浮细胞)、动物器官(如乳腺等)生产重组蛋白。佰莱博生物拥有经验丰富的技术团队和专业高效的重组蛋白表达纯化技术,可提供毫克至克级高纯度高活性重组蛋白定制服务。拥有原核蛋白表达系统、和哺乳动物细胞蛋白表达系统,可以提供蛋白表达与纯化方面的多种选择。提供从表达方案设计、密码子优化、表达条件筛选优化、蛋白纯化、大规模蛋白制备的全流程蛋白表达纯化技术服务。


技术流程

1. 蛋白分析及表达方案设计

2. 目的蛋白基因合成及载体构建

3. 目的蛋白表达条件测试以及优化

4. 目的蛋白纯化和检测

5. 依据小试结果进行放大培养及表达纯化、检测分析(可选)

蛋白表达纯化技术流程图


佰莱博生物拥有经验丰富的技术团队和专业高效的重组蛋白表达纯化技术,可提供毫克至克级高纯度高活性重组蛋白定制服务,同时也提供大肠杆菌无细胞表达系统蛋白表达纯化服务及蛋白质相互作用筛选及验证服务。


佰莱博生物提供生物物理、生物化学、细胞生物学及计算机模拟等多个层面分子互作筛选及验证服务。主要技术平台包括:SPR、MST、ITC、BLI、DSF、Small Pull-Down、小分子免疫荧光(小分子荧光共定位)、Target engagement (TE) assay、CETSA、GST Pull-Down、Co-IP 等分子互作验证技术;配体垂钓、化学蛋白质组学(ABPP)、CETSA-MS、体外药筛 (AlphaScreen、ADP-Glo、TR-FRET) 等分子互作筛选技术;化合物合成及探针制备、生物偶联、蛋白表达纯化等生物活性分子制备技术;高内涵细胞成像与分析(HCS,High-content screening)、Incucyte®长时间活细胞成像分析、酶联免疫斑点技术 (ELISPOT)、Luminex液相悬浮芯片等细胞分析技术;nanoDSF、MALS (动静态光散射)、AUC (分析型超离)、CD (圆二色光谱技术) 等生物分子表征技术;计算机模拟 (分子对接、虚拟筛选、反向找靶、分子动力学模拟) 等生物信息学技术。提供生物分子互作分析、靶点筛选、药物筛选、化合物合成及生物偶联、蛋白表达纯化、细胞因子检测、生物大分子表征及制剂筛选等实验服务。

目前,佰博莱生物分子互作平台已经完成了1500多种蛋白的分子互作检测实验。针对热门医药研究靶点如:T 细胞的主要免疫调节因子 (Gal-1,Gal-3和Gal-9)、与糖尿病相关的胰岛素受体 (IR-A、IR-B、IGF-1R)、GLP-1R 等、血管内皮生长因子 (VEGF 121、VEGF165)、免疫球蛋白 Fc 受体 (Fcγ RI、Fcγ RIIB、Fcγ RIIIA、不同种属的FcRn) 、免疫球蛋白超家族的细胞黏附分子 (Nectin-1,Nectin-2,Nectin-3,Nectin-4) 及整合素家族 (aVβ5、ITGB1、aVβ3等) 等重要靶点已具备成熟检测方法。