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靶点识别是发现和开发新天然药物的关键步骤，化学蛋白质组学在靶点鉴定上具有广泛的应用空间，下面给大家分享一篇应用化学蛋白质组学技术鉴定分子靶点的高分文章。

分享了一篇通过热蛋白质组分析（TPP）技术鉴定出小分子PF403的靶点蛋白NAMPT，并利用CETSA、MST、SPR和ITC证实了二者的高亲和力结合。结合结构生物学与计算生物学（动力学模拟和丙氨酸扫描突变），筛选出NAMPT的关键互作氨基酸，最终通过NanoDSF和MST技术验证Y188为PF403结合的关键位点。

本研究以FXR蛋白为靶点，利用SPR单浓度筛选FDA批准药物库，鉴定出Mebhydrolin为FXR新型配体。通过MST和细胞动物实验验证其生物学活性，结合分子对接与动力学模拟确定关键结合位点。最后采用丙氨酸扫描突变和MST实验，证实L291、M332和Y373是介导Mebhydrolin与FXR特异性结合的关键氨基酸。

微量热泳动技术(MST)技术能够精确测定小分子药物与蛋白的亲和力，具有高稳定性和重复性，能够有效小分子PUll-down、CETSA、DARTS等定性方法可能出现的假阳性或假阴性问题。本文分享了两个 MST测定小分子药物与蛋白互作的案例。

研究药物分子与靶点之间的三元或多元互作是药物研发和信号通路的常用实验手段，如何检测多个分子间的结合亲和力呢？采用微量热泳动 (MST) 技术可以在溶液中表征多元互作。本文分享一篇Nature 主刊上采用MST微量热泳动技术测定多个分子间亲和力分析案例。

本文介绍了分子对接、CETSA和MST技术用于验证中药单体与靶点蛋白结合。文章首先强调分子对接预测结合模式需实验验证的必要性，再介绍CETSA和MST在细胞和生物物理层面的检测原理，并通过高分文章案例讲解了如何利用这些技术验证中药单体与靶点蛋白的结合。

本文提出基于序列比对、突变体设计与MST验证的蛋白质互作验证策略。通过序列保守性分析构建关键位点突变体及截短蛋白，应用MST技术精确测定靶蛋白结合能力，量化野生型与突变体亲和力差异。该方法为蛋白质互作研究提供了高效可靠的技术路径。

本文分享了一篇冷冻电镜结构解析、MST微量热泳动及分子动力学模拟组合应用揭示药物作用机制的案例。结合肽设计与冷冻电镜技术，解析SLC19A2/A3高分辨率三维结构，通过微量热泳动（MST）及分子动力学模拟阐明其介导药物作用机制。

本文介绍了利用SPR配体垂钓技术进行医药找靶的基本原理，并分享了一篇用SPR配体垂钓技术筛选中药活性成分的案例。

本文分享了一篇利用TPP筛选药物靶点蛋白的案例，通过CETSA细胞热迁移实验、MST微量热泳动实验验证了化合物和靶蛋白的结合。进一步利用HDX-MS氢氘交换质谱、分子对接及MST测定突变蛋白与化合物亲和力变化验证化合物结合关键氨基酸位点。

本文分享了一篇冷冻电镜结构解析、MST微量热泳动及分子动力学模拟组合应用揭示药物作用机制的案例。结合肽设计与冷冻电镜技术，解析SLC19A2/A3高分辨率三维结构，通过微量热泳动（MST）及分子动力学模拟阐明其介导药物作用机制。本文通过构建GFP融合蛋白的策略，成功解决了膜蛋白难以表达纯化不能做分子互作实验的难题。

该研究通过MST微量热泳动、ABPP化学蛋白质组学、CETSA、小分子Pull-down等技术，发现甲异靛（Mei）与PKMYT1形成可逆结合，并借助E3连接酶TRIM25增强二者相互作用，加速PKMYT1由泛素化和蛋白酶体降解。

天然产物中的药用成分被广泛用于临床和治疗，而筛选天然产物中能与靶点蛋白互作的小分子则是实验关键。本文为大家分享一篇高分文章案例，研究者基于SPR、分子对接和分子动力学模拟等技术对发现的小分子药物进行检测，证明了该小分子能与靶点结合。

本文提出了一种METAL-TPP的化学蛋白质组学方法，通过螯合剂处理蛋白、整个热蛋白质组分析（TPP/CETSA）、ITC检测及结构分析，实现金属结合蛋白的筛选和结合验证。

靶点识别是发现和开发新天然药物的关键步骤，化学蛋白质组学是靶点筛选的重要方法，分享一篇应用ABPP化学蛋白质组学技术筛选作用靶点的文章，并使用MST微量热泳动+ITC等温滴定量热+CETSA+DARTS+小分子pull-down+分子对接等技术进行靶点结合验证，并对蛋白和化合物结合的关键氨基酸位点进行了鉴定。